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产品注明
本产品蕴含各类酶法组织消化中常用的胶原酶等蛋白酶,能特异性地降解胞表胶原蛋白,使胶原蛋白和纤维粘连蛋白的网状结构解离,而不败坏细胞表表结构的齐全性。使用本产品进行组织消化能够使组织中细胞间的桥连结构松动,使组织由块状造成絮状,经过机械奏乐后造成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液。造备的细胞悬液可用于原代造就、流式细胞仪进行细胞生物学(如凋亡、增殖、细胞周期等)钻研。合用领域:各类正常乳腺和乳腺肿瘤组织,从中分离得到原代细胞,蕴含上皮细胞,间质细胞,成纤维细胞等。
使用注明
-20℃避光保留6个月内有效。
(1)提前将消化酶从-20℃冰箱取出置于2-8℃消融;
(2)将冰盒表表消毒后移入超净台内。在无菌前提下,冰上在造就皿中将组织样本置于组织洗濯液内洗濯3~5 s。
(3)在无菌前提下,将洗濯后的组织样本浸没在盛有10 ml组织洗濯液的造就皿中。冰上选取无菌手术刀将样本机械切割成1~2 mm3大幼后,将样品碎块转移至50 mL无菌离心管中;
(4)参与10~20 mL组织洗濯液于离心管中,1200 rpm 4℃离心5 min;
(5)弃上清,参与10~30 mL本消化酶(消化酶体积至少为组织体积的5倍),象征样本名称及编号并用封口膜封口,放入恒温振荡造就箱中消化,设置参数37 ℃、100~200 rpm(凭据样性质地设置转快),待组织消化至出现团絮状(通常1幼时左右),即可终止消化;
(6)取出消化好的样本,参与5 mL含血清DMEM造就基,100 μm细胞筛网过滤。
(7)将过筛后的细胞悬液于350 g常温离心5 min。
(8)弃上清后,细胞沉淀参与原代细胞造就基待用。
当苦衷项
1. 本产品通例在-20℃保留。使用前需在2-8℃消融,消融后需在一周内使用结束。
2. 使用本产品时该把稳无菌操作,预防传染。
3. 为维持本产品的最佳使用成效,通常在37℃前提下使用,凭据具体尝试情况也可在2-8℃前提下使用。
4. 本产品的消化功夫必要凭据样品大幼进行摸索,对于宝贵样品,为达到最佳的分离成效,可选取二次分步消化方式(即将初次消化的组织残渣网络后,沉复如上操作步骤1~8)。
5. 请于保质期内使用本产品,超出保质期后,将无法达到梦想的使用成效。
6. 本产品仅用于科研用处,不能用于体表诊断。
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