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造就基
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胃癌类器官造就基是一种为推进人源胃癌类器官体表形成和扩增而开发的造就基。它是一种无菌的液体混合系统，含有必须和非必须的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、成长因子、微量矿物质等。该造就基的怪异配方能够提供一个相宜的人源胃癌类器官体表造就环境，选择性地推进体表人源胃癌类器官的成长。
使用注明
1. 胃癌类器官造就
将获取的胃癌原代细胞悬液计数，凭据推算好的体积汲取细胞悬液参与预冷的1.5 mL离心管中，补齐预冷的造就基至所需体积，将预冷后的细胞悬液参与等体积的Matrigel基质胶(Corning)中轻轻混匀(全程冰上操作)，使得胃癌原代细胞终浓度为5X106个细胞/毫升。而后将细胞与基质胶的混合液依照50-60 μL/孔呈半球形点胶于24孔板。将造就板放入5%CO2、37℃造就箱中30 min，待Matrigel胶齐全凝固。沿孔壁每孔缓慢参与500 μL预先复原至室温的类器官造就基，置5%CO2、37℃造就箱造就。3天后镜下观察类器官形成情况，粒径大于30~50 μm即以为类器官已经形成，每3天更换一次造就基进行造就，持续观察类器官大幼，镜下观察大部门类器官大幼均大于30~50 μm且大幼不再增大即可网络类器官进行后续尝试。
2.胃癌类器官网络
弃造就基，每孔参与500 μL预冷DF12，反复奏乐至基质胶齐全脱离板底，网络至15 mL离心管中，1500 rpm离心5 min，轻轻吸去上清和基质胶层，待用。
3. 胃癌类器官传代
网络的类器官，参与3-5 mL类器官解离试剂（PRS-ODR），37℃，200 rpm水平摇床振荡消化（具体功夫凭据类器官大幼和数量决定，以肉眼可见颗粒显著减幼一半为准，可中央取缔化的类器官显微镜观察，类器官消化至蕴含有3~10个细胞的细胞团块最佳）；消化齐全后选取等体积的含10% FBS的DMEM造就基终止消化。1500 rpm离心3 min，弃上清，使用洗濯液沉悬沉淀后1500 rpm再次离心3 min；参与预冷的胃癌类器官造就基进行沉悬，计数，依照造就步骤操作持续造就。
有关产品
货号： PRS-GCM-2D
货号： PRS-GCM-CR
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