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造就基
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急性髓系白血病造就基是一种为推进人源急性髓系白血病原代细胞体表成长而设计的齐全造就基。它是一种无菌的液体混合系统，含有必须和非必须的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、成长因子、微量矿物质等。造就基基于碳酸氢盐的缓冲系统，在5% CO2、37℃空气的造就箱中平衡时，pH值为7.4。该造就基的配方(定量和定性)，能够提供一个相宜的平衡的体表造就环境，选择性地推进人源急性髓系白血病原代细胞的成长。
使用注明
1. 样品分离
(1) 使用移液器将抗凝管中的表周血或骨髓样本混匀，转移至15 mL无菌离心管中，1500 rpm 离心5 min;
(2) 弃血浆，向血细胞沉淀中参与3~5倍1 x PBS稀释至9 mL，充分混匀;
(3) 另取15 mL离心管，参与6 mL人表周血淋巴细胞分离液，倾斜缓慢地参与上述稀释的血细胞沉淀，与分离液显著分层，设置转快400 g、升快2、降快0、温度25 ℃，离心30 min;
(4) 离心后，离心管中由上至下细胞分四层(PBS层、环状乳白色细胞层、分离液层、红细胞层)，移液器环形汲取白细胞层至预先参与5 mL 1 x PBS的15 mL离心管中，轻轻混匀洗涤细胞，1500 rpm室温离心3 min;
(5) 弃上清，参与6 mL 红细胞裂解液沉悬细胞沉淀，4 ℃裂解15~20 min，中央颠倒混匀一次，1500 rpm室温离心3 min;
(6) 弃上清，参与1~5 mL齐全造就基沉悬细胞沉淀，活细胞计数后(细胞活率至少>50%)，接种活细胞于造就瓶/板，置37 ℃、5%二氧化碳造就箱中造就。
2. 细胞传代
(1) 镜下观察细胞状态，待悬浮细胞长满至 80%～90% 时即可传代;
(2) 将细胞悬液转移至15 mL离心管，1500 rpm室温离心3 min;
(3) 弃上清，以1~2 mL造就基沉悬细胞，活细胞计数，接种活细胞于造就瓶/板，置37 ℃、5%二氧化碳造就箱中造就。
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货号： PRS-ALLM
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